Biotin-LC-NHS 是一種廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域的生物素化試劑，其核心功能是將生物素分子共價(jià)連接到含氨基（-NH?）的生物分子上，如蛋白質(zhì)、抗體和核酸等。

化學(xué)結(jié)構(gòu)與組成

Biotin-LC-NHS 的核心結(jié)構(gòu)由三部分組成：

1. 生物素（Biotin）：一種水溶性、非毒性維生素（維生素H或B7），具有與親和素（Streptavidin）或鏈霉親和素（Avidin）高親和力結(jié)合的特性，結(jié)合親和常數(shù)較高（Kd ~10?1? M），確保標(biāo)記分子與靶分子形成穩(wěn)定復(fù)合物。

2. 長(zhǎng)鏈間隔臂（LC, Long Chain）：通常是一個(gè)由6-12個(gè)碳原子組成的柔性鏈狀結(jié)構(gòu)，如6-氨基己酸長(zhǎng)鏈。其作用是增加生物素與目標(biāo)分子之間的距離，減少空間位阻，提高標(biāo)記效率，同時(shí)保持標(biāo)記分子的生物活性。

3. 活性N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS）：分子末端的NHS酯能與蛋白質(zhì)或多肽中的自由氨基（如賴氨酸殘基）進(jìn)行共價(jià)偶聯(lián)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。NHS酯在水溶液中水解速率可控，需在pH 7–9的緩沖液中操作以確保反應(yīng)效率。

物理與化學(xué)性質(zhì)

• 外觀：通常為白色至淺黃色固體。

• 溶解性：易溶于有機(jī)溶劑如二甲基亞砜（DMSO）、乙腈或二氯甲烷，同時(shí)在水相中緩慢水解。

• 穩(wěn)定性：在干燥、有機(jī)溶劑或低溫條件下相對(duì)穩(wěn)定，可長(zhǎng)期儲(chǔ)存。但在水溶液中易水解，需在使用前新鮮配制或在有機(jī)溶劑中保存。

功能與應(yīng)用

1. 蛋白質(zhì)標(biāo)記：

• 用于標(biāo)記抗體、酶等蛋白質(zhì)，便于后續(xù)的檢測(cè)或純化。

• 標(biāo)記后的蛋白仍保持結(jié)構(gòu)完整性和生物活性，廣泛用于免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中抗體或蛋白質(zhì)的高效標(biāo)記，如ELISA、Western blot、免疫沉淀等。

2. 核酸標(biāo)記：

• 標(biāo)記DNA或RNA，用于雜交實(shí)驗(yàn)或測(cè)序。

3. 細(xì)胞表面標(biāo)記：

• 標(biāo)記細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)，研究細(xì)胞間相互作用。

4. 分子捕獲與純化：

• 通過(guò)親和素磁珠或親和層析，實(shí)現(xiàn)蛋白或核酸分子的高效捕獲和純化。

5. 生物傳感器和芯片技術(shù)：

• 在生物傳感器和蛋白質(zhì)芯片中，用于穩(wěn)定固定蛋白或配體，實(shí)現(xiàn)高靈敏檢測(cè)。

6. 藥物遞送與靶向研究：

• 用于構(gòu)建生物素-親和素系統(tǒng)的藥物遞送平臺(tái)，實(shí)現(xiàn)靶向治療或分子追蹤。

使用注意事項(xiàng)

• 儲(chǔ)存條件：建議儲(chǔ)存于-20°C的干燥環(huán)境中，避光避濕，以保持試劑的穩(wěn)定性和活性。

• 溶解試劑：將Biotin-LC-NHS溶解在無(wú)水DMSO或DMF中，確保全溶解。

• 反應(yīng)條件：將溶解后的試劑與目標(biāo)分子（如蛋白質(zhì)或核酸）在pH 7-9的緩沖液中混合，室溫或4℃反應(yīng)1-2小時(shí)。

• 純化：通過(guò)透析、凝膠過(guò)濾或親和層析去除未反應(yīng)的試劑。

• 安全警示：僅用于科研，不能用于人體。

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