Biotin hydrazide HCl（生物素酰肼鹽酸鹽）是一種重要的生物標記試劑，其核心結構由生物素基團、酰肼基團（-NH-NH?）和鹽酸鹽（HCl）組成，具有特殊的理化性質和廣泛的應用場景。

一、理化性質

1. 外觀與狀態：亮黃色或白色固體粉末，純度通常≥95%。

2. 分子式與分子量：分子式為C??H??ClN?O?S，分子量約為294.80 g/mol。

3. 溶解性：

• 溶于大部分有機溶劑（如DMSO，溶解度≤20 mg/mL）。

• 溶于水，鹽酸鹽形式顯著提高了水溶性，便于在水相緩沖液中反應。

4. 熔點與沸點：熔點為245-247℃，沸點預測值為633.1±40.0℃（760 mmHg）。

5. 穩定性：

• 鹽酸鹽形式更穩定，便于長期儲存，避免游離酰肼的氧化變質。

• 需避光保存，防止光照引起的分解。

結構式：

二、核心功能

1. 酰肼基團的反應特異性：

• 酰肼基團（-NH-NH?）可與醛基（-CHO）或酮基（-CO-）在弱酸性條件（pH 4.0-6.0）下發生縮合反應，生成穩定的腙鍵（-C=N-NH-）。

• 這種反應對醛/酮基具有高度特異性，不與氨基、羧基等其他基團反應，可實現精準標記。

2. 鹽酸鹽形式的優勢：

• 顯著提高生物素酰肼的水溶性，使其能在水相緩沖液中溶解并反應，無需添加有機溶劑。

• 形式更穩定，便于長期儲存。

3. 生物素的高親和性：

• 偶聯后可通過親和素/鏈霉親和素系統高效富集目標分子，富集效率可達90%以上。

• 適用于后續的檢測、分離或純化。

三、應用場景

1. 糖蛋白標記與純化：

• 通過高碘酸氧化糖蛋白的糖鏈生成醛基，再與Biotin hydrazide HCl偶聯，實現糖蛋白的特異性生物素化。

• 標記后的糖蛋白可通過鏈霉親和素包被的磁珠或瓊脂糖珠進行純化，獲得高純度糖蛋白，用于糖鏈結構分析或功能研究。

2. 核酸標記：

• 可與醛基修飾的DNA/RNA反應，制備生物素化核酸探針。

• 用于Southern blot、Northern blot等雜交實驗，提高檢測靈敏度。

3. 蛋白質碳基化檢測：

• 作為探針用于檢測蛋白質碳基化，這是一種由活性氧或脂質氧化產物引起的不可逆翻譯后修飾。

• 在pH 5.5條件下，Biotin hydrazide HCl可專一性地衍生化碳基基團，便于測量生物樣品中的碳基化蛋白質。

4. 細胞表面標記：

• 用于生物素化并分離細胞表面糖蛋白，有助于研究細胞表面分子的功能和相互作用。

四、使用注意事項

1. 安全防護：

• 操作時佩戴手套、護目鏡及實驗服，避免直接接觸或吸入粉末。

• 避免形成粉塵和氣溶膠，使用非火花工具，防止靜電放電引起的火災。

• 廢棄物按化學危險品處理，不可隨意丟棄。

2. 儲存條件：

• 短期保存：2-8℃，避光。

• 長期保存：建議冷藏，保持容器密封，防止受潮和光照。

3. 反應優化：

• 確保目標分子含醛基或酮基，或通過氧化處理生成醛基。

• 控制反應pH在4.0-6.0范圍內，以獲得最佳標記效率。

• 反應后需通過透析、柱層析等方法去除未結合試劑。

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