Biotin sulfo-N-hydroxysuccinimide ester 是一種水溶性生物素化試劑,全稱 Sulfosuccinimidyl biotin(磺基琥珀酰亞胺基生物素),簡稱 Sulfo-NHS-Biotin,核心功能是通過酰胺鍵高效標記含游離氨基(-NH?)的生物分子,廣泛用于蛋白質、抗體、多肽的生物素化修飾。
結構特點分子由三部分組成:
生物素端:與鏈霉親和素 / 親和素具有超高親和力(Kd≈10?1? M),用于后續靶標分子的捕獲、分離或檢測。
間隔臂:短碳鏈連接生物素與活性酯,降低空間位阻,保障偶聯效率。
磺基 - NHS 酯端:磺酸鹽基團(-SO??) 賦予分子優異水溶性,無需有機溶劑助溶;NHS 酯基團可與伯氨基(如蛋白質賴氨酸殘基的 ε-NH?)在溫和條件下反應,生成穩定酰胺鍵,同時釋放 N - 羥基琥珀酰亞胺(NHS)。
反應條件
緩沖體系:優選 PBS(pH 7.0-8.5) 或碳酸氫鈉緩沖液(pH 8.0-8.5),避免使用含氨基的緩沖液(如 Tris、甘氨酸),防止競爭反應。
反應溫度:室溫或 4℃,反應時間 30 min-2 h,具體取決于靶標分子濃度。
終止反應:加入過量甘氨酸(終濃度 50 mM)或 Tris 緩沖液,孵育 10-15 min 淬滅未反應的 NHS 酯基團。
水溶性優異:磺基修飾解決了傳統 NHS-Biotin(CAS 35013-72-0)水溶性差的問題,可直接溶于水相反應體系,避免使用 DMF、DMSO 等有機溶劑對生物分子活性的破壞。
反應特異性高:僅與游離伯氨基高效偶聯,不與巰基、羧基等其他基團反應,標記位點可控。
生物相容性好:標記后不影響靶標分子的生物活性,適用于活體、細胞及體外實驗體系。
防潮處理:NHS 酯基團對水敏感,易水解失效,試劑需在干燥環境下取用,開封后盡快使用。
pH 控制:反應體系 pH 需嚴格控制在 7.0-8.5,pH 過低會降低 NHS 酯活性,pH 過高會加速 NHS 酯非特異性水解。
純化步驟:反應后需通過透析、凝膠過濾層析(如 Sephadex G-25)去除游離生物素和副產物,避免干擾后續實驗。
投料比:根據靶標分子的氨基數量調整試劑與底物的摩爾比(通常 1:5-1:20),過高投料比易導致過度標記,影響分子活性。
關于我們:
陜西星貝愛科生物科技經營的產品種類包括有:合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性納米顆粒、納米金及納米金棒、近紅外熒光染料、活性熒光染料、熒光標記物、蛋白交聯劑、小分子PEG衍生物、點擊化學產品、樹枝狀聚合物、環糊精衍生物、大環配體類、熒光量子點、透明質酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳納米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二氧化硅,聚合物微球,近紅外熒光染料,聚苯乙烯微球,上轉換納米發光顆粒,MRI核磁造影產品,熒光蛋白及熒光探針等等。
溫馨提示:供應產品僅用于科研,不能用于人體!
相關產品:
Hederagenin-Biotin,Biotin-常春藤皂苷元
青蒿琥酯-生物素,Artesunate-Biotin
Biotin-甘草次酸
生物素-亞麻木酚素
生物素標記胰島素 Biotin-Insulin
生物素-昆布多糖,Biotin-Glucan
草酰乙酸-生物素Oxobutanedioic acid-BIOTIN
OVA-BIOTIN,卵清蛋白修飾生物素
Posaconazole-NHS,泊沙康唑-活化酯
大黃素-生物素,Emodin-BIOTIN