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介紹一下甘氨鵝去氧膽酸-雞卵清白蛋白偶聯物的制備方法

2024-10-11 [98]

甘氨鵝去氧膽酸-雞卵清白蛋白偶聯物|Glycochenodeoxycholic Acid-Ovalbumin Conjugate(GCDCA-OVA)

以下是一種可能的甘氨鵝去氧膽酸 - 雞卵清白蛋白偶聯物的制備方法:

一、材料準備

甘氨鵝去氧膽酸(Glycochenodeoxycholic acidGCDCA)。

雞卵清白蛋白(OvalbuminOVA)。

偶聯試劑,如碳二亞胺類(如 1 - 乙基 -(3 - 二甲基氨基丙基) 碳二亞胺鹽酸鹽,EDC)、N - 羥基琥珀酰亞胺(NHS)等。

緩沖液,如磷酸鹽緩沖液(PBS)等。

透析袋或超濾裝置。

 

二、具體步驟

活化甘氨鵝去氧膽酸

將甘氨鵝去氧膽酸溶解在適當的緩沖液中,如 PBS

加入一定量的偶聯試劑 EDC NHS,在一定溫度下(如室溫)攪拌反應一段時間,使甘氨鵝去氧膽酸的羧基活化。

 

偶聯反應

將雞卵清白蛋白也溶解在適當的緩沖液中,并調整到合適的濃度。

將活化后的甘氨鵝去氧膽酸溶液緩慢加入到雞卵清白蛋白溶液中,在一定溫度下(如室溫或 37℃)攪拌反應數小時。

 

純化

反應結束后,可以使用透析袋或超濾裝置對反應混合物進行純化,去除未反應的甘氨鵝去氧膽酸、偶聯試劑以及其他雜質。透析可以使用合適的緩沖液,在低溫下(如 4℃)進行,定期更換透析液,以確保充分去除雜質。

 

鑒定

對制備得到的甘氨鵝去氧膽酸 - 雞卵清白蛋白偶聯物進行鑒定。可以采用多種方法,如紫外 - 可見光譜分析,觀察偶聯物的吸收光譜變化;SDS-PAGE 電泳,分析蛋白質的分子量變化;以及免疫分析等方法,確定偶聯是否成功以及偶聯效率。

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